单核苷酸多态性与原发性肝细胞癌易感性的研究进展

【关键词】  癌,肝细胞； 多态性，单核苷酸； 易感性

Association between single-nucleotide polymorphism and susceptibility to hepatocellular carcinoma    GU Xing, GAO Chun-fang.

【Key words】 Carcinoma, hepatocellular; Polymorphism, single nucleotide; Susceptibility

【First author’s address】 Department of Laboratory Medicine, Eastern Hepatobiliary Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200438, China

Corresponding author: GAO Chun-fang, Email: gaocf1115@  163..com

人群特异的癌症遗传性与DNA序列中的多态性变异有关。人类基因组中最常见的序列变异是单个碱基的稳定替换，即单个核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）。人体许多表型、对药物的敏感性或疾病的易感性差异等都可能与SNP相关，已有人将SNP称为第三代遗传标志。原发性肝细胞癌（HCC）某些特定的SNP可以通过改变基因的功能和表达影响个体对HCC的易感性，具体可能在多种途径发挥作用，现就能够影响HCC发病风险的SNP位点综述如下。

一、代谢酶类基因

环境中的有害物质被认为是导致人类癌症发生的重要因素，而这些致癌物在体内的代谢过程涉及多种酶系。这些代谢酶基因在体内具有重要意义，其基因多态性能调节组织中这些代谢酶的表达丰度，并影响产物酶的活性，使得机体对黄曲霉毒素B1（AFB1）等有害物的解毒功能产生差异，从而使不同个体患癌症危险性有所不同。

1. 细胞色素P450：Mochizuki等[1]对日本人群的细胞色素P450基因家族多态性进行了大规模研究，分析了CYP1A2、CYP2D6、CYP2A6、CYP2C19等基因上的多个位点，研究结果显示，仅CYP2A6*4A多态性与HCC易感性相关。Li等[2]检测了汉族人群中上千例确诊HCC患者以及健康对照者CYP1A1的多态性，发现该基因中的rs4646421和rs2198843位点能显著增加HCC易感性，而rs4886605位点却能降低HCC易感性，并且在非吸烟人群中这种效果更明显。

2．谷胱甘肽转硫酶（glutathione S-transferase，GST）：White等[3]总结了2006年以前研究GST基因多态性与HCC易感性关系的文献，并进行了Meta分析，结果显示GSTM1缺失型、GSTT1缺失型和GSTP1 A313G都能小幅改变HCC易感性，但都不显著。对于GSTO家族SNP的报道仅有1篇，为GSTO1 A140D和GSTO2 N142D位点，前者未发现相关性，而后者显著提高了HCC易感性[4]。最近，Ladero等[5]通过对患有HCC的西班牙白种人与同人种健康对照者的比较分析，显示GSTP1 Ile105Val、GSTA1*B和GSTM3*B 3-bp缺失型基因多态性与HCC易感性不存在相关性。

二、DNA合成及修复相关基因

DNA合成相关基因可以改变DNA的稳定性以及基因的表达，而DNA修复系统是机体内主要的防御屏障，参与修复由内外环境因素所致的DNA损伤。DNA合成及修复基因的多态性是导致DNA损伤修复能力存在个体差异，从而影响HCC易感性的主要原因之一。

1．亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR）：MTHFR是DNA合成和甲基化修饰过程中至关重要的分子之一。Mu等[6]研究了江苏泰兴人群中MTHFT基因C677T和A1298C多态性位点与HCC易感性的关系，结果显示两者之间存在高度的连锁不平衡，并且C677T多态性能够提高HCC易感性。而在韩国人群中的类似研究仅发现MTHFR A1298C多态性能提高HCC易感性[7]。另外，通过对意大利肝移植、慢性肝炎和酒精性肝病等晚期患者与正常人对照进行了基因型分析，结果发现酒精肝病人中+677位TT基因型与HCC显著相关，酒精肝硬化患者且携带TT基因型的男性具有高HCC风险[8]。

2．组蛋白脱乙酰基酶（histone deacetylases，HDAC）：HDAC是去除组蛋白和非组蛋白乙酰化基团的关键酶，在包括DNA修复以及转录调控在内的多种过程中发挥重要作用。通过对上千例韩国人基因型的分析，发现组蛋白脱乙酰基酶HDAC10启动子中C-589T多态性与慢性乙型肝炎患者的HCC易感性相关[9]。

三、细胞因子

细胞因子是由细胞分泌的，具有介导和调节免疫、炎症和细胞增殖分化能力的小分子蛋白质，是在细胞间传递信息的生物分子。多种细胞因子及受体在HCC发生发展过程中发挥重要作用，其SNP与HCC易感性的关系正逐渐成为研究热点。

1．转化生长因子β1（TGFβ1）：TGFβ1具有广泛的生物功能，双向调节是其重要特点。它既能在肿瘤形成早期阶段阻滞细胞生长周期并诱导细胞凋亡，从而抑制肿瘤细胞生长；又能在肿瘤进展中作为肿瘤生长、浸润和转移的重要刺激因子，促进肿瘤的发展进级。Migita等[10]检测了日本人群HBV感染者（其中包括HCC患者）肿瘤坏死因子α、干扰素γ、TGFβ1、白细胞介素（IL）-6和-10多态性位点和发生HCC的相关性。结果显示TGFβ1的第10位密码子C/C基因型在患有HBV相关的HCC患者中的分布频率低于非HCC患者，该SNP与HBV相关的HCC易感性相关。本课题组前期也对中国人群中TGFβ1 C-509 T多态性与HBV相关的HCC易感性进行了相关性研究，结果发现该SNP能改变TGFβ1蛋白在肝脏组织中的表达量，从而与慢性HBV感染者发生HCC有关[11]。

2．白介素1β（IL-1β）：IL-1β的主要功能是激活T细胞、B细胞以及单核细胞。有学者Hirankarn等[12]对泰国慢性HBV感染者（包括HCC患者和非HCC患者）和健康者IL-1β基因-511位多态性进行分析后发现该位点C/C基因型与HCC显著相关，并且该位点C等位基因在患者中显现更高的等位基因频率，而在同时研究的IL-1RN基因中没有发现显著相关的多态性位点。Sakamoto等[13]采用了病例对照方法，分析了日本人群中HCC样本和院内对照及非HCC的慢性肝病患者IL-1β和TNFα基因的多态性，研究其对HCC易感性的影响以及其中酒精和烟草的作用。结果显示IL-1β基因T-31C多态性与从未饮酒者和现时吸烟者的HCC易感性有关。

此外，细胞因子还能与其他基因一起在HCC发生发展上发挥协同作用。Chen等[14]对台湾地区HBV相关HCC患者及非HCC的HBV携带者的细胞因子IL-1β、IL-1RN、TNFα、抗氧化酶GST和DNA修复基因XRCC1, hMLH1和XPD基因中的10个SNP位点进行研究，结果发现hMLH1-93*A能够显著增加HCC的易感性，并且存在IL-1RN*2等位基因时，IL-1β-31位点与HCC发生具有相关性，而IL-1β、TNFα、hMLH1和XRCC1的基因多态性对HBV相关的HCC易感性呈现剂量依赖的相关性，并且吸烟可以增加这种遗传易感性。

四、p53基因及其泛素连接酶MDM2基因

p53基因涉及多种重要的细胞进程，是一个很好的HCC易感性候选调控因子；它在HCC中表现出较高的突变率，并且一些病毒蛋白能够使其失去生物活性。MDM2是p53蛋白的泛素连接酶，直接参与p53蛋白的降解，调控其在体内的功能发挥。Dhare等[15]研究了日本慢性丙型肝炎（HCV）感染者（包括HCC患者）的MDM2基因启动子区域-309位点。结果显示在HCC患者中G/G基因型分布明显高于非HCC患者，进一步多变量分析结果显示HCC发生与多种因素独立相关，包括该位点基因型、60岁以上、男性、存在肝硬化、甲胎蛋白大于20μg/L、血清白蛋白大于3.2g/dL。对于p53第72位密码子多态性与HCC易感性的关系还倍受争议。Zhu等[16]检测了中国人群的该位点多态性，发现其与HBV感染者HCC易感性无关，但是Pro等位基因能增加非HBV感染者发生HCC的风险，男性、HCC家族史这两个因素在增加HCC风险中与该位点具有协同作用。Yoon等[17]通过对583位HBV感染者（其中包括287位HCC患者）这两位点进行分析，发现MDM2基因型G/G和p53基因型Pro/Pro在HCC患者中更常见，进一步的多元分析结果显示两者协同作用的OR值更是达到了20.78。该研究还发现这两个多态性与韩国人HBV相关的HCC早发有关。此外，在摩洛哥人群中，p53的第72位密码子多态性是一个HCC发生的显著相关因子，特别是在女性和非HCV感染者中[18]。

五、其他基因  

近期来，与HCC相关的SNP研究方向更加宽广。SPP1是一种包含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸的分泌型磷蛋白，它在转移性肝癌中过量表达。在一组对上千例韩国人群SPP1基因型多态性的研究中发现ht2[T-T-C-T-A]与HBV病毒的清除有关， G-1800T位点多态性与其都和HBV相关的HCC发病年龄具有相关性[19]。对甲胎蛋白(AFP)SNP分析发现，其启动子区域-330,-401和-692三个位点的多态性造成AFP血清表达水平的显著改变，并且C-692G与HCC易感性具有相关性[20]。

长期以来被忽略的位于基因内含子中的SNP与HCC的发生也具有相关性，这为今后的研究开辟了一条新道路。如对韩国人整合素αV内含子中13处SNP位点进行分析后，发现内含子中rs9333289、rs11685758、rs1839123位点以及单倍型3（T-T-A）与HBV相关的HCC易感性相关，rs2290083位点与慢性HBV以及HBV相关的HCC易感性都相关，这些位点都增强了韩国人群对于慢性HBV感染和HCC的易感性[21]。

六、展望

HCC的发生发展是由多基因参与的一种变异渐进积累转化的过程，与个体基因多态性密切关联。多种基因SNP与HCC易感性存在相关性，这种相关性在不同人群中存在差异。然而大多数涉及HCC进程的遗传因子还有待研究。近期，越来越多的报道解释了内含子的SNP与疾病易感性的相关性。尽管内含子中多态性影响疾病易感性的机制研究难度较大，但是如能攻克这一难关，建立内含子中多态性功能研究的新平台，将为人类疾病诊断和防治提供更为广阔的空间。

参  考  文  献

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